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更新于 10-15 21:55

技能介绍

用途:将宏基因组 FASTQ 数据一路处理到物种分类与功能通路丰度结果,覆盖质控、去宿主、分类、丰度估计、功能分析和可视化。

主要能力:

  1. 质控与去宿主:fastp 去接头与过滤,Bowtie2 去除宿主读段。
  2. 物种分类:Kraken2 分类,Bracken 估计丰度并合并多样本矩阵;备选 MetaPhlAn 标记基因分析并合并结果。
  3. 功能分析:HUMAnN 计算通路丰度,humann_renorm_table 归一化,humann_join_tables 合并。
  4. 可视化:用 pandas、matplotlib、seaborn 绘制 Top 物种热图与堆叠柱状图。

使用方式:按流程顺序执行各步骤命令,示例中通过 for 循环批量处理样本。关键命令包括 fastp、bowtie2、kraken2、bracken、combine_bracken_outputs.py、metaphlan、merge_metaphlan_tables.py、humann、humann_renorm_table、humann_join_tables。

参数建议:fastp --length_required 50;Kraken2 --confidence 0.0 或 0.1;Bracken -r 读长(如 150)、-l S 或 G、-t 10;MetaPhlAn --min_cu_len 2000;HUMAnN --threads 8+。

适用场景:鸟枪法宏基因组样本的物种与功能谱分析。

限制:结果依赖参考数据库,低分类率或高未分类可能源于数据库不匹配、新物种或宿主污染;HUMAnN 处理大文件较慢。资料未提供具体数据库构建步骤、安装命令及收费信息。