用途:提供 CLIP-seq 从原始测序数据到结合位点与 motif 富集的端到端分析流程,适用于分析基于 CLIP 方法的蛋白-RNA 相互作用。
主要能力:流程覆盖 FASTQ → QC → UMI 提取 → 接头修剪 → 比对 → 过滤 → 去重 → peak calling → 注释 → motif 分析。支持 HITS-CLIP、PAR-CLIP、iCLIP、eCLIP 等变体,并说明各方法在 UMI、交联位点、接头上的差异。
使用方式:按步骤执行。QC 用 fastqc;UMI 提取用 umi_tools extract,eCLIP 用 --bc-pattern=NNNNNNNNNN,iCLIP 用 --bc-pattern=NNNNNXXXXX;接头修剪用 cutadapt;比对用 STAR,需先建索引;过滤用 samtools view -b -F 4 -q 10;去重用 umi_tools dedup;peak calling 推荐 clipper,也可用 Piranha 或 PARalyzer;注释用 bedtools intersect 或 annotatePeaks.pl;motif 分析用 findMotifs.pl 或 meme-chip;交联位点分析用 bedtools genomecov。资料还给出完整 bash 脚本示例。
适用场景:分析 CLIP 类方法的蛋白-RNA 相互作用数据,进行结合位点鉴定与 motif 富集。
限制:资料未提供软件版本、安装方式、运行环境要求、具体物种或基因组版本适用范围、性能与耗时信息,也未说明各步骤的替代方案取舍标准;部分工具(如 PARpipe)仅提及名称,未给出用法。