用途:把多重抗体成像(CODEX/PhenoCycler、MIBI-TOF、IMC、CyCIF、Opal/Vectra mIF)得到的细胞×标志物蛋白强度矩阵,转成带表型标签的细胞和空间邻域结果。核心原则是蛋白强度为连续信号,受抗体、批次、染色条件与检测器影响,不是分子计数,因此不能用 log1p 当作 UMI 处理;应使用 arcsinh(或 z-score/百分位)做方差稳定,并做溢漏补偿与批次校正。抗体面板是预先选定的,缺失通常意味着未染色而非蛋白不存在,无法做无先验发现。分割是主要下游误差来源,建议用膜/边界染色的全细胞分割(如 Mesmer/DeepCell)。
主要能力:按平台区分化学与混杂(CODEX 循环配准漂移与光漂白;MIBI/IMC 金属通道溢漏与半定量;CyCIF 漂白重染;Opal 低重数与光谱解混);强度变换与归一化;溢漏与批次校正;门控(scimap.tl.phenotype_cells,需 group/phenotype/标志物 DataFrame 与 pos/neg/allpos 编码,先 sm.pp.rescale)或无监督聚类(scimap.tl.cluster);空间邻域富集(squidpy.gr.spatial_neighbors 用 coord_type='generic',再 nhood_enrichment)与细胞邻域(sm.tl.spatial_count 后 spatial_cluster)。
用法要点:示例经 scimap 2.0+、scanpy 1.10+、anndata 0.10+、squidpy 1.4+ 测试;使用前用 pip show 核对版本。arcsinh 辅因子从 5 起但需按数据集调优,避免近零噪声被过度展开。IMC/MIBI 的溢漏补偿与端到端流程应交给 imaging-mass-cytometry 相关技能。
适用场景:已知谱系标志物的门控表型、面板内无监督聚类、空间邻域与生态位分析。限制:面板外类型不可见;共现不等于通讯,未测配体-受体;结果受变换、辅因子、k 与分割影响,需报告并做敏感性分析;双阳性常为溢漏或分割伪影。