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bio-proteomics-ptm-analysis

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更新于 10-15 21:55

技能介绍

用途:把PTM/磷酸化蛋白质组分析拆成三层推断——富集化学选择、位点定位(FLR)、定量,并强调每层都可能静默失败。核心观点:富集本身就是实验,化学选择与生物学混杂;鉴定肽段不等于定位修饰;磷酸肽丰度变化不等于磷酸化变化,需用同一批样本的配对全蛋白组减去蛋白丰度变化。

主要能力:涵盖富集化学框架(TiO2、Fe-IMAC、Ti4+/Zr4+-IMAC、SIMAC)、位点定位打分(Ascore、PhosphoRS/ptmRS、PTMProphet、MaxQuant Localization prob、DIA定位、DeepFLR)、位点FLR估计(LuciPHOr、LuciPHOr2、decoy氨基酸FLR)、蛋白水平校正(MSstatsPTM::groupComparisonPTM)、motif分析与激酶活性推断(KSEA、PTM-SEA、RoKAI)。

使用方式:先展开MaxQuant Phospho (STY)Sites表的多重磷酸化列(Intensity___1/2/3),过滤Reverse/污染物与Localization prob(class I ≥0.75),生成位点强度矩阵;再用MaxQtoMSstatsPTMFormat读入evidence.txt、注释、FASTA与proteinGroups,经dataSummarizationPTM与groupComparisonPTM得到PTM.Model、PROTEIN.Model、ADJUSTED.Model,仅以ADJUSTED.Model显著者判定受调控。motif分析须用实验匹配的S/T/Y背景,而非全蛋白组。

适用场景:磷酸化位点调控判定、方法间差异排查、泛素化位点识别、激酶活性推断。

限制:不实现完整糖肽糖组成搜索与三比值SILAC绝对占有率;肽段鉴定、蛋白定量、DIA采集机制分别路由到其他技能。版本需匹配MSstatsPTM 2.4+、pandas 2.2+、numpy 1.26+、scipy 1.12+。激酶推断受PhosphoSitePlus先验偏倚限制,暗激酶不可见。未提供收费与平台信息。