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bio-proteomics-protein-inference

数据与分析

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更新于 10-15 21:55

技能介绍

用途:自下而上质谱只观测肽段,蛋白质集合需推断。本技能负责肽段到蛋白质的分组、不可区分与可包含蛋白的区分、代表蛋白约定、推断方法选择,以及蛋白质/蛋白组FDR控制。PSM与肽段级FDR、定量中razor与unique肽段的影响分别属于肽段鉴定与定量范畴;剪接异构体、单氨基酸变异、PTM蛋白变体不在范围内。

主要能力:支持基于简约法的分组(pyOpenMS BasicProteinInferenceAlgorithm,开启annotate_indistinguishable_groups),以及贝叶斯推断(EPIFANY,TOPP工具名Epifany;pyOpenMS类名随版本变化,需先用help(pyopenms.EpifanyAlgorithm)确认)。也提及ProteinProphet、Fido、MaxQuant razor肽段、picked-protein与picked-group FDR。

使用方式:加载FDR过滤后的idXML(IdXMLFile().load,protein_ids在前),运行推断后从protein_ids的getIndistinguishableProteins()读取组与代表accession。EPIFANY需输入带后验错误概率的PSM。picked-group FDR按目标/诱饵配对保留高分者再计数。

适用场景:标准DDA、OpenMS、MaxQuant、FragPipe/TPP流程,深度数据集,敏感差异丰度分析前的分组。

限制:蛋白质推断欠定,应以组而非平铺列表报告;朴素蛋白质FDR在深度数据会膨胀至10-30%,应使用picked FDR;两肽规则会升高FDR并丢弃真实蛋白,不应使用;razor定量可能造成假差异;自下而上分组无法解析蛋白变体。参考示例经pyOpenMS 3.1+、pandas 2.2+测试,版本不符需自行核对API。